Ταυτοποίηση βιοχημικών μορίων ενδεικτικών της ποιότητας των ωαρίων και της έκβασης της εγκυμοσύνης στο ωοθυλακικό περιβάλλον γυναικών που υποβάλλονται σε υποβοηθούμενη αναπαραγωγή
Φόρτωση...
Ημερομηνία
Συγγραφείς
Αντωνίου, Βασιλική
Τίτλος Εφημερίδας
Περιοδικό ISSN
Τίτλος τόμου
Εκδότης
Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων. Σχολή Θετικών Επιστημών. Τμήμα Χημείας
Περίληψη
Τύπος
Είδος δημοσίευσης σε συνέδριο
Είδος περιοδικού
Είδος εκπαιδευτικού υλικού
Όνομα συνεδρίου
Όνομα περιοδικού
Όνομα βιβλίου
Σειρά βιβλίου
Έκδοση βιβλίου
Συμπληρωματικός/δευτερεύων τίτλος
Περιγραφή
Η υπογονιμότητα αποτελεί ένα βασικό και ολοένα και αυξανόμενο πρόβλημα της σύγχρονης κοινωνίας που απασχολεί το 8-12% των ζευγαριών παγκοσμίως ενώ οι υπογόνιμες γυναίκες αγγίζουν το 10 % του συνολικού γυναικείου πληθυσμού. Ο Π.Ο.Υ αναγνωρίζει την υπογονιμότητα ως αναπηρία κατατάσσοντας της στην 5η θέση των πιο σοβαρών αναπηριών του γυναικείου πληθυσμού. Τα αίτια που την προκαλούν φαίνεται να ποικίλουν και οφείλονται σε παθολογικές καταστάσεις, σε παράγοντες φυσιολογικούς , ανατομικούς, ορμονικούς ή ακόμα και κοινωνικούς που εμφανίζονται τόσο στον άνδρα όσο και στην γυναίκα . Επιδρά σημαντικά στην ψυχολογία ενός ζευγαριού και ασκεί πίεση στην μεταξύ τους σχέση. Η υποβοηθούμενη αναπαραγωγή και οι τεχνικές που την αποτελούν έχουν δώσει λύση στο πρόβλημα αυτό και έχουν μειώσει σε σημαντικό βαθμό τα ποσοστά υπογονιμότητας. Ωστόσο τα ποσοστά επιτυχίας δεν βρίσκονται ακόμα σε επιθυμητά επίπεδα.
Προκειμένου αυτές οι μέθοδοι να γίνουν όσο το δυνατόν περισσότερο αποδοτικές είναι σημαντικό να μελετηθούν παράγοντες που μπορούν να υπονομεύσουν την ποιότητα των ωαρίων, των ωοθυλακίων. Κεντρικό ρόλο σε αυτό παίζει το περιβάλλον του ωαρίου δηλαδή το ωοθυλακικό υγρό και τα κοκκώδη κύτταρα. Συστατικά του ωοθυλακικού υγρού που προκύπτουν από την κυκλοφορία του αίματος που διαπερνούν τον ωοθυλακικό φραγμό και προϊόντα που εκκρίνονται από τα κοκκώδη κύτταρα και τα κύτταρα θήκης θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν ως πιθανοί βιοδείκτες που αντανακλούν την ποιότητα του ωαρίου . Eπίσης, παράγοντες των κοκκωδών κυττάρων καθώς και η απόπτωση αυτών μπορούν να αποτελέσουν προγνωστικούς δείκτες του αναπτυξιακού δυναμικού των ωαρίων και της ποιότητας τους, καθώς είναι απαραίτητος ο κατάλληλος αριθμός κοκκωδών κυττάρων, για μια ικανοποιητική ωοθυλακική απάντηση στις γοναδοτροφίνες που καθορίζεται από το ρυθμό πολλαπλασιασμού και προγραμματισμένου κυτταρικού θανάτου.
Όλα αυτά λοιπόν, αποτέλεσαν έναυσμα για να μελετήσουμε το ωοθυλακικό υγρό και τα κοκκώδη κύτταρα από ωοθυλάκια γυναικών που υποβάλλονται σε υποβοηθούμενη αναπαραγωγή. Συγκεκριμένα, για το ωοθυλακικό υγρό έγινε προσπάθεια εύρεσης και ανίχνευσης εκκρινόμενων πρωτεϊνών όπως η ιντερλευκίνη IL-6, ο παράγοντας VEGF, μεμβρανικών πρωτεϊνών όπως ο υποδοχέας FSH-R, και πρωτεϊνών του μονοπατιού της απόπτωσης όπως η προ- αποπτωτική πρωτεΐνη Bax και η αντι-αποπτωτική πρωτεΐνη Bcl2, με την μέθοδο ανοσοαποτύπωσης western blotting . Όσον αφορά τα κοκκώδη κύτταρα, πραγματοποιήθηκε έλεγχος επιπέδων σημαντικών πρωτεινών του μονοπατιου της αυτοφαγίας όπως το LC3-I , LC3-II και της απόπτωσης όπως η Bcl2 καθώς και πρωτεϊνών που σχετίζονται με την μιτοχονδριακή λειτουργία όπως είναι η μιτοχονδριακή πρωτεάση Lonp1 με λειτουργικό ρόλο και η μιτοχονδριακή πορίνη VDAC, με δομικό ρόλο χρησιμοποιώντας την μέθοδο western blotting. Τα επίπεδα αυτών των πρωτεϊνών και οι διαφορές που εντοπίστηκαν μεταξύ των υπό μελέτη γυναικών συσχετίστηκαν με διάφορα χαρακτηριστικά τους όπως η ηλικία, αλλά και το πρωτόκολλο διέγερσης των ωοθηκών με απώτερο στόχο να επιτευχθεί εγκυμοσύνη στα προγράμματα υποβοηθούμενης αναπαραγωγής.
Τέλος, επειδή το ωοθυλακικό υγρό βρίθει από πρωτεΐνες του ορού του πλάσματος οι οποίες δυσχεραίνουν την ανίχνευση άλλων πρωτεϊνών, εγκαθιδρύθηκε μία μεθοδολογία απομάκρυνσης των πρωτεϊνών αυτών και κανονικοποίησης των ζωνών που λαμβάνουμε για τα ωοθυλακικά υγρά χωρίς την χρήση ακτίνης. Συμπερασματικά, τα παραπάνω πειράματα προσέφεραν την δυνατότητα εύρεσης κάποιων πιθανών μορίων βιοδεικτών , ενδεικτικών της ποιότητας των ωοκυττάρων .
Infertility is a major and growing problem in modern society, affecting 8-12% of couples worldwide, while infertile women account for 10% of the total female population. The WHO recognises infertility as a disability, ranking it as the 5th most serious disability in the female population. The causes appear to be varied and are due to pathological conditions, physiological, anatomical, hormonal or even social factors that occur in both men and women. It significantly affects the psychology of a couple and puts pressure on the relationship between them. Assisted reproduction and its constituent techniques have provided a solution to this problem and have significantly reduced infertility rates. However, success rates are not yet at desirable levels. In order to make these methods as effective as possible, it is important to study factors that can undermine the quality of the oocytes and follicles. Central to this is the environment of the oocyte like the follicular fluid and granulosa cells. Components of the follicular fluid resulting from the blood circulation that pass through the follicular barrier and products secreted by granulosa cells and sheath cells could be used as potential biomarkers reflecting the quality of the oocyte. Also, granulocyte factors and granulocyte apoptosis may be predictive indicators of oocyte development potential and quality, as an adequate number of granulocytes is necessary for a satisfactory follicular response to gonadotrophins determined by the rate of proliferation and programmed cell death. All of these, has led us to study the follicular fluid and granulosa cells from the follicles of women undergoing assisted reproduction. Specifically, for follicular fluid, an attempt was made to find and detect secreted proteins such as interleukin IL-6, VEGF factor, membrane proteins such as FSH-R receptor, and apoptosis pathway proteins such as pro-apoptotic protein Bax and anti-apoptotic protein Bcl2, by immunoblotting western blotting. As for granulosa cells, levels of important autophagy pathway proteins such as LC3-I, LC3-II and apoptosis pathway proteins such as Bcl2 as well as proteins related to mitochondrial function such as mitochondrial protease Lonp1 with a functional role and mitochondrial porin VDAC, with a structural role were tested using western blotting method. The levels of these proteins and the differences detected between the women undergoing assisted reproduction were correlated with various characteristics such as age, and the ovarian stimulation protocol with the ultimate goal of achieving pregnancy in assisted reproduction programs. Finally, because follicular fluid is full of plasma serum proteins that make it difficult to detect other proteins, a methodology was established to remove these proteins and normalize the bands obtained for follicular fluids without the use of actin. In conclusion, the above experiments offered the possibility of finding some possible biomarker molecules indicative of oocyte quality.
Infertility is a major and growing problem in modern society, affecting 8-12% of couples worldwide, while infertile women account for 10% of the total female population. The WHO recognises infertility as a disability, ranking it as the 5th most serious disability in the female population. The causes appear to be varied and are due to pathological conditions, physiological, anatomical, hormonal or even social factors that occur in both men and women. It significantly affects the psychology of a couple and puts pressure on the relationship between them. Assisted reproduction and its constituent techniques have provided a solution to this problem and have significantly reduced infertility rates. However, success rates are not yet at desirable levels. In order to make these methods as effective as possible, it is important to study factors that can undermine the quality of the oocytes and follicles. Central to this is the environment of the oocyte like the follicular fluid and granulosa cells. Components of the follicular fluid resulting from the blood circulation that pass through the follicular barrier and products secreted by granulosa cells and sheath cells could be used as potential biomarkers reflecting the quality of the oocyte. Also, granulocyte factors and granulocyte apoptosis may be predictive indicators of oocyte development potential and quality, as an adequate number of granulocytes is necessary for a satisfactory follicular response to gonadotrophins determined by the rate of proliferation and programmed cell death. All of these, has led us to study the follicular fluid and granulosa cells from the follicles of women undergoing assisted reproduction. Specifically, for follicular fluid, an attempt was made to find and detect secreted proteins such as interleukin IL-6, VEGF factor, membrane proteins such as FSH-R receptor, and apoptosis pathway proteins such as pro-apoptotic protein Bax and anti-apoptotic protein Bcl2, by immunoblotting western blotting. As for granulosa cells, levels of important autophagy pathway proteins such as LC3-I, LC3-II and apoptosis pathway proteins such as Bcl2 as well as proteins related to mitochondrial function such as mitochondrial protease Lonp1 with a functional role and mitochondrial porin VDAC, with a structural role were tested using western blotting method. The levels of these proteins and the differences detected between the women undergoing assisted reproduction were correlated with various characteristics such as age, and the ovarian stimulation protocol with the ultimate goal of achieving pregnancy in assisted reproduction programs. Finally, because follicular fluid is full of plasma serum proteins that make it difficult to detect other proteins, a methodology was established to remove these proteins and normalize the bands obtained for follicular fluids without the use of actin. In conclusion, the above experiments offered the possibility of finding some possible biomarker molecules indicative of oocyte quality.
Περιγραφή
Λέξεις-κλειδιά
Ωοθυλακικό μικροπεριβάλλον, Βιοδείκτες ωοθυλακικού υγρού, Βιοδείκτες κοοκωδών κυττάρων ωοφόρου δίδκου, Ποιότητα ωαρίου
Θεματική κατηγορία
Ιατρική χημεία
Παραπομπή
Σύνδεσμος
Γλώσσα
el
Εκδίδον τμήμα/τομέας
Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων. Σχολή Θετικών Επιστημών. Τμήμα Χημείας
Όνομα επιβλέποντος
Μιχαηλίδης, Θεολόγος
Εξεταστική επιτροπή
Γεωργίου, Ιωάννης
Ζηκόπουλος, Κωνσταντίνος
Μιχαηλίδης, Θεολόγος
Ζηκόπουλος, Κωνσταντίνος
Μιχαηλίδης, Θεολόγος
Γενική Περιγραφή / Σχόλια
Ίδρυμα και Σχολή/Τμήμα του υποβάλλοντος
Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων. Σχολή Θετικών Επιστημών
Πίνακας περιεχομένων
Χορηγός
Βιβλιογραφική αναφορά
Ονόματα συντελεστών
Αριθμός σελίδων
142 σ.
Λεπτομέρειες μαθήματος
item.page.endorsement
item.page.review
item.page.supplemented
item.page.referenced
Άδεια Creative Commons
Άδεια χρήσης της εγγραφής: CC0 1.0 Universal