Protein secretion biotechnology using Streptomyces lividans: large-scale production of functional trimeric tumor necrosis factor alpha
Φόρτωση...
Ημερομηνία
Συγγραφείς
Pozidis, C.
Lammertyn, E.
Politou, A. S.
Anne, J.
Tsiftsoglou, A. S.
Sianidis, G.
Economou, A.
Τίτλος Εφημερίδας
Περιοδικό ISSN
Τίτλος τόμου
Εκδότης
Περίληψη
Τύπος
Είδος δημοσίευσης σε συνέδριο
Είδος περιοδικού
peer-reviewed
Είδος εκπαιδευτικού υλικού
Όνομα συνεδρίου
Όνομα περιοδικού
Biotechnol Bioeng
Όνομα βιβλίου
Σειρά βιβλίου
Έκδοση βιβλίου
Συμπληρωματικός/δευτερεύων τίτλος
Περιγραφή
We evaluated the feasibility of large-scale production of biopharmaceuticals expressed as heterologous polypeptides from the Gram-positive bacterium Streptomyces lividans. As a model protein we used murine tumor necrosis factor alpha (mTNFalpha). mTNFalpha fused C-terminally to the secretory signal peptide of the subtilisin-inhibitor protein from Streptomyces venezuelae. Under appropriate fermentation conditions, significant amounts of mature mTNFalpha (80-120 mg/L) can be recovered from spent growth media. Efficient downstream processing allowing rapid purification of mTNFalpha from culture supernatants was developed. Importantly, the protein is recovered from the spent growth medium in its native trimeric state as judged by biophysical analysis. Further, mTNFalpha secreted by S. lividans is significantly more active in an in vitro apoptosis tissue culture assay than a corresponding polypeptide produced in Escherichia coli. This pilot study provides the first validation of S. lividans protein secretion as an alternative bioprocess for large-scale production of oligomeric proteins of potential therapeutic value.
Περιγραφή
Λέξεις-κλειδιά
Bioreactors, Cell Culture Techniques/*methods, Culture Media/pharmacology, Feasibility Studies, Fermentation, Glucose/pharmacology, Pilot Projects, Polymers/metabolism, Quality Control, Recombinant Proteins/biosynthesis/secretion, Streptomyces/drug effects/*metabolism, Tumor Necrosis Factor-alpha/biosynthesis/chemistry/isolation &, purification/*secretion
Θεματική κατηγορία
Παραπομπή
Σύνδεσμος
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11460252
http://onlinelibrary.wiley.com/store/10.1002/1097-0290(20010320)72:6<611::AID-BIT1026>3.0.CO;2-0/asset/26_ftp.pdf?v=1&t=h0dhin0k&s=79311a00ec2b3431d643e7afd06abf6432fe8bbd
http://onlinelibrary.wiley.com/store/10.1002/1097-0290(20010320)72:6<611::AID-BIT1026>3.0.CO;2-0/asset/26_ftp.pdf?v=1&t=h0dhin0k&s=79311a00ec2b3431d643e7afd06abf6432fe8bbd
Γλώσσα
en
Εκδίδον τμήμα/τομέας
Όνομα επιβλέποντος
Εξεταστική επιτροπή
Γενική Περιγραφή / Σχόλια
Ίδρυμα και Σχολή/Τμήμα του υποβάλλοντος
Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων. Σχολή Επιστημών Υγείας. Τμήμα Ιατρικής