Αξιολόγηση της παρασίτωσης από blastocystis hominis και μελέτη των γονότυπων των στελεχών
Φόρτωση...
Ημερομηνία
Συγγραφείς
Βασάλος, Κωνσταντίνος Μ.
Τίτλος Εφημερίδας
Περιοδικό ISSN
Τίτλος τόμου
Εκδότης
Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων Σχολή Ιατρικής Τμήμα Ιατρικής Τομέας Λειτουργικός - Κλινικοεργαστηριακός. Εργαστήριο Μικροβιολογίας
Περίληψη
Τύπος
Είδος δημοσίευσης σε συνέδριο
Είδος περιοδικού
Είδος εκπαιδευτικού υλικού
Όνομα συνεδρίου
Όνομα περιοδικού
Όνομα βιβλίου
Σειρά βιβλίου
Έκδοση βιβλίου
Συμπληρωματικός/δευτερεύων τίτλος
Περιγραφή
Εισαγωγή. Η Blastocystis hominis, πρωτόζωο του εντέρου που εμφανίζει διάφορες μορφές, ανιχεύεται συχνά στους ανθρώπους. Το ενδεχόμενο παθογόνων και μη παθογόνων υποτύπων διερευνάται. Υλικά και μέθοδοι. Αναπτύξαμε νέο, απλούστερο υλικό από 2,5 ml κεκλιμένο άγαρ και τροποποιημένο κατά Stone διάλυμα του Locke με 20% πεπτόνη και 30% ορό ίππου θερμικά αδρανοποιημένου με τελικό όγκο 6,5 ml. Για την ανίχνευση Blastocystis απευθείας από δείγματα κοπράνων, αλλά και από καλλιέργειες, χρησιμοποιήθηκε PCR σε συνδυασμό με ανάλυση πολυμορφισμού διαμόρφωσης μονόκλωνου DNA [single strand conformation polymprphism (SSCP)] και ανάλυση νουκλεοτιδικής αλληλουχίας. Οι συλλοιμώξεις με παράσιτα του εντέρου αποκλείσθηκαν με παρασιτολογική εξέταση. Με ξενικές καλλιέργειες (προσθήκη αμύλου ορύζης) επιβεβαιώθηκαν οι μονοπαρασιτώσεις από Blastocystis και εξετάσθηκε η μορφολογία της. Με καλλιέργειες και PCR-SSCP μελετήθηκε η συσχέτιση γονοτύπων/φαινοτυπικών χαρακτηριστικών του παρασίτου σε άτομα ανοσοεπαρκή που είχαν μόνο Blastocystis. Αποτελέσματα. Το νέο υλικό χρησιμοποιήθηκε για καλλιέργεια 25 θετικών και 20 αρνητικών για Blastocystis δείγματα. Σε σύγκριση με το υλικό του Robinson, ένα καθιερωμένο καλλιεργητικό υλικό δύο φάσεων, βρέθηκε εφάμιλλο ως προς την απομόνωση και τον έλεγχο της παρουσίας αμοιβαδοειδών μορφών. Φάνηκε ότι θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί για διατήρηση της Blastocystis. Με PCR-SSCP, που εφαρμόσθηκε σε 45 θετικά και 30 αρνητικά για Blastocystis δείγματα κοπράνων και αποδείχθηκε πολύ ευαίσθητη και ειδική, κατέστη δυνατή η ταξινόμηση Blastocystis στους εννέα καθιερωμένους υποτύπους. Το ποσοστό της παρασίτωσης από Blastocystis εκτιμήθηκε με μικροσκόπηση 1913 δειγμάτων κοπράνων στο 3,5% του πληθυσμού που εξετάσαμε στην Ελλάδα. Τα 32 στελέχη που απομονώθηκαν από ασυμπτωματικά ατόμα με μονοπαρασίτωση παρουσίασαν μόνο κενοτοπιώδεις (και κοκκιώδεις) μορφές στις καλλιέργειές τους, το 50% άνηκε στους υποτύπους 1, 2 και 7, ενώ στο υπόλοιπο 50% βρέθηκε υπότυπος 3. Ο υπότυπος 3 ανιχνεύθηκε, επίσης, σε 12 ασθενείς με μονοπαρασίτωση και ήπια χρόνια γαστρεντερικά συμπτώματα. Σε ένα ασθενή που εκδήλωσε οξεία κνίδωση και ήπια γαστρεντερικά συμπτώματα το στέλεχος ταυτοποιήθηκε ως υπότυπος 3 της Blastocystis sp. και παρήγαγε αμοιβαδοειδείς μορφές στην καλλιέργεια. Αμοιβαδοειδείς Blastocystis παρατηρήθηκαν παρομοίως στις καλλιέργειες 11/12 συμπτωματικών στελεχών του υποτύπου 3. Στα συμπτωματικά στελέχη διακρίναμε αμοιβαδοειδείς από άλλες μορφές και Blastocystis χωρίς συγκεκριμένο σχήμα, αλλά και ενδεχόμενη κατάτμηση του κυτταροπλάσματος των αμοιβαδοειδών. Σε ένα ασθενή απομονώσαμε στέλεχος υποτύπου 4 που παρουσιάσθηκε ως αμοιβαδοειδής. Συμπέρασμα. Η PCR-SSCP συμβάλλει, ως μέθοδος απλή, σε μελέτες μοριακής επιδημιολογίας και κλινικής σημασίας της Blastocystis. Πρώτη φορά αναφέρθηκε εμφάνιση αμοιβαδοειδών μορφών σε συμπτωματικό στελέχος υποτύπου 4. Η μορφολογία διέφερε μεταξύ ασυμπτωματικών και συμπτωματικών στελεχών του υποτύπου 3. Συνεπώς, ενδέχεται ο κατ’εξοχήν γονότυπος του ανθρώπου, ο υποτύπος 3 (ή στελέχη του), που παρουσιάζει αμοιβαδοειδείς μορφές στις καλλιέργειες να είναι παθογόνος. Είναι δυνατό, προς το παρόν, με αναζήτηση αμοιβαδοειδών μορφών σε υλικό δύο φάσεων, όπως το απλοποιημένο, να γίνεται απλά ο έλεγχος ασθενών με συμπτώματα σχετιζόμενα με Blastocystis για δυνητικά παθογόνους υποτύπους ή στελέχη.
Περιγραφή
Λέξεις-κλειδιά
Υπότυποι 3 και 4 της Blastocystis, Αμοιβαδοειδείς μορφές Blastocystis, Γαστρεντερικά συμπτώματα, Κνίδωση, Νεό απλοποιήμενο υλικό για την καλλιέργεια της Blastocystis, PCR-SSCP για άμεση ανίχνευση/τυποποίηση Blastocystis
Θεματική κατηγορία
Μικροβιολογία
Παραπομπή
Σύνδεσμος
http://thesis.ekt.gr/thesisBookReader/id/18315#page/1/mode/2up
Γλώσσα
el
Εκδίδον τμήμα/τομέας
Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων Σχολή Ιατρικής Τμήμα Ιατρικής Τομέας Λειτουργικός - Κλινικοεργαστηριακός. Εργαστήριο Μικροβιολογίας
Όνομα επιβλέποντος
-
Εξεταστική επιτροπή
Βακάλης, Νικόλαος
Μαυρίδης, Ανέστης
Φατούρος, Μιχαήλ
Λειβαδιώτου-Στεφάνου, Σταματίνα
Παπαδοπούλου, Χρυσάνθη
Τσιάρα, Σταυρούλα
Γαϊτάνης, Γεώργιος
Μαυρίδης, Ανέστης
Φατούρος, Μιχαήλ
Λειβαδιώτου-Στεφάνου, Σταματίνα
Παπαδοπούλου, Χρυσάνθη
Τσιάρα, Σταυρούλα
Γαϊτάνης, Γεώργιος
Γενική Περιγραφή / Σχόλια
Ίδρυμα και Σχολή/Τμήμα του υποβάλλοντος
Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων Σχολή Ιατρικής Τμήμα Ιατρικής Τομέας Λειτουργικός - Κλινικοεργαστηριακός. Εργαστήριο Μικροβιολογίας
Πίνακας περιεχομένων
Χορηγός
Βιβλιογραφική αναφορά
Βιβλιογραφία: σ. 111-141
Ονόματα συντελεστών
Αριθμός σελίδων
144 σ.