Αξιολόγηση της παρασίτωσης από blastocystis hominis και μελέτη των γονότυπων των στελεχών
| dc.contributor.author | Βασάλος, Κωνσταντίνος Μ. | el |
| dc.date.accessioned | 2015-10-15T07:18:18Z | |
| dc.date.available | 2015-10-15T07:18:18Z | |
| dc.identifier.uri | https://olympias.lib.uoi.gr/jspui/handle/123456789/664 | |
| dc.identifier.uri | http://dx.doi.org/10.26268/heal.uoi.560 | |
| dc.rights | Default License | |
| dc.subject | Υπότυποι 3 και 4 της Blastocystis | el |
| dc.subject | Αμοιβαδοειδείς μορφές Blastocystis | el |
| dc.subject | Γαστρεντερικά συμπτώματα | el |
| dc.subject | Κνίδωση | el |
| dc.subject | Νεό απλοποιήμενο υλικό για την καλλιέργεια της Blastocystis | el |
| dc.subject | PCR-SSCP για άμεση ανίχνευση/τυποποίηση Blastocystis | el |
| dc.title | Αξιολόγηση της παρασίτωσης από blastocystis hominis και μελέτη των γονότυπων των στελεχών | el |
| heal.abstract | Εισαγωγή. Η Blastocystis hominis, πρωτόζωο του εντέρου που εμφανίζει διάφορες μορφές, ανιχεύεται συχνά στους ανθρώπους. Το ενδεχόμενο παθογόνων και μη παθογόνων υποτύπων διερευνάται. Υλικά και μέθοδοι. Αναπτύξαμε νέο, απλούστερο υλικό από 2,5 ml κεκλιμένο άγαρ και τροποποιημένο κατά Stone διάλυμα του Locke με 20% πεπτόνη και 30% ορό ίππου θερμικά αδρανοποιημένου με τελικό όγκο 6,5 ml. Για την ανίχνευση Blastocystis απευθείας από δείγματα κοπράνων, αλλά και από καλλιέργειες, χρησιμοποιήθηκε PCR σε συνδυασμό με ανάλυση πολυμορφισμού διαμόρφωσης μονόκλωνου DNA [single strand conformation polymprphism (SSCP)] και ανάλυση νουκλεοτιδικής αλληλουχίας. Οι συλλοιμώξεις με παράσιτα του εντέρου αποκλείσθηκαν με παρασιτολογική εξέταση. Με ξενικές καλλιέργειες (προσθήκη αμύλου ορύζης) επιβεβαιώθηκαν οι μονοπαρασιτώσεις από Blastocystis και εξετάσθηκε η μορφολογία της. Με καλλιέργειες και PCR-SSCP μελετήθηκε η συσχέτιση γονοτύπων/φαινοτυπικών χαρακτηριστικών του παρασίτου σε άτομα ανοσοεπαρκή που είχαν μόνο Blastocystis. Αποτελέσματα. Το νέο υλικό χρησιμοποιήθηκε για καλλιέργεια 25 θετικών και 20 αρνητικών για Blastocystis δείγματα. Σε σύγκριση με το υλικό του Robinson, ένα καθιερωμένο καλλιεργητικό υλικό δύο φάσεων, βρέθηκε εφάμιλλο ως προς την απομόνωση και τον έλεγχο της παρουσίας αμοιβαδοειδών μορφών. Φάνηκε ότι θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί για διατήρηση της Blastocystis. Με PCR-SSCP, που εφαρμόσθηκε σε 45 θετικά και 30 αρνητικά για Blastocystis δείγματα κοπράνων και αποδείχθηκε πολύ ευαίσθητη και ειδική, κατέστη δυνατή η ταξινόμηση Blastocystis στους εννέα καθιερωμένους υποτύπους. Το ποσοστό της παρασίτωσης από Blastocystis εκτιμήθηκε με μικροσκόπηση 1913 δειγμάτων κοπράνων στο 3,5% του πληθυσμού που εξετάσαμε στην Ελλάδα. Τα 32 στελέχη που απομονώθηκαν από ασυμπτωματικά ατόμα με μονοπαρασίτωση παρουσίασαν μόνο κενοτοπιώδεις (και κοκκιώδεις) μορφές στις καλλιέργειές τους, το 50% άνηκε στους υποτύπους 1, 2 και 7, ενώ στο υπόλοιπο 50% βρέθηκε υπότυπος 3. Ο υπότυπος 3 ανιχνεύθηκε, επίσης, σε 12 ασθενείς με μονοπαρασίτωση και ήπια χρόνια γαστρεντερικά συμπτώματα. Σε ένα ασθενή που εκδήλωσε οξεία κνίδωση και ήπια γαστρεντερικά συμπτώματα το στέλεχος ταυτοποιήθηκε ως υπότυπος 3 της Blastocystis sp. και παρήγαγε αμοιβαδοειδείς μορφές στην καλλιέργεια. Αμοιβαδοειδείς Blastocystis παρατηρήθηκαν παρομοίως στις καλλιέργειες 11/12 συμπτωματικών στελεχών του υποτύπου 3. Στα συμπτωματικά στελέχη διακρίναμε αμοιβαδοειδείς από άλλες μορφές και Blastocystis χωρίς συγκεκριμένο σχήμα, αλλά και ενδεχόμενη κατάτμηση του κυτταροπλάσματος των αμοιβαδοειδών. Σε ένα ασθενή απομονώσαμε στέλεχος υποτύπου 4 που παρουσιάσθηκε ως αμοιβαδοειδής. Συμπέρασμα. Η PCR-SSCP συμβάλλει, ως μέθοδος απλή, σε μελέτες μοριακής επιδημιολογίας και κλινικής σημασίας της Blastocystis. Πρώτη φορά αναφέρθηκε εμφάνιση αμοιβαδοειδών μορφών σε συμπτωματικό στελέχος υποτύπου 4. Η μορφολογία διέφερε μεταξύ ασυμπτωματικών και συμπτωματικών στελεχών του υποτύπου 3. Συνεπώς, ενδέχεται ο κατ’εξοχήν γονότυπος του ανθρώπου, ο υποτύπος 3 (ή στελέχη του), που παρουσιάζει αμοιβαδοειδείς μορφές στις καλλιέργειες να είναι παθογόνος. Είναι δυνατό, προς το παρόν, με αναζήτηση αμοιβαδοειδών μορφών σε υλικό δύο φάσεων, όπως το απλοποιημένο, να γίνεται απλά ο έλεγχος ασθενών με συμπτώματα σχετιζόμενα με Blastocystis για δυνητικά παθογόνους υποτύπους ή στελέχη. | |
| heal.academicPublisher | Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων Σχολή Ιατρικής Τμήμα Ιατρικής Τομέας Λειτουργικός - Κλινικοεργαστηριακός. Εργαστήριο Μικροβιολογίας | el |
| heal.academicPublisherID | uoi | |
| heal.access | free | |
| heal.advisorName | - | |
| heal.bibliographicCitation | Βιβλιογραφία: σ. 111-141 | |
| heal.classification | Μικροβιολογία | el |
| heal.committeeMemberName | Βακάλης, Νικόλαος | el |
| heal.committeeMemberName | Μαυρίδης, Ανέστης | el |
| heal.committeeMemberName | Φατούρος, Μιχαήλ | el |
| heal.committeeMemberName | Λειβαδιώτου-Στεφάνου, Σταματίνα | el |
| heal.committeeMemberName | Παπαδοπούλου, Χρυσάνθη | el |
| heal.committeeMemberName | Τσιάρα, Σταυρούλα | el |
| heal.committeeMemberName | Γαϊτάνης, Γεώργιος | el |
| heal.fullTextAvailability | false | |
| heal.identifier.secondary | http://thesis.ekt.gr/thesisBookReader/id/18315#page/1/mode/2up | |
| heal.language | el | |
| heal.numberOfPages | 144 σ. | |
| heal.publicationDate | 2009 | |
| heal.recordProvider | Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων Σχολή Ιατρικής Τμήμα Ιατρικής Τομέας Λειτουργικός - Κλινικοεργαστηριακός. Εργαστήριο Μικροβιολογίας | el |
| heal.type | doctoralThesis | |
| heal.type.el | Διδακτορική διατριβή | el |
| heal.type.en | Doctoral thesis | en |
Αρχεία
Φάκελος/Πακέτο αδειών
1 - 1 of 1
Φόρτωση...
- Ονομα:
- license.txt
- Μέγεθος:
- 1.71 KB
- Μορφότυπο:
- Item-specific license agreed upon to submission
- Περιγραφή: